№ 2. 2013 г.
Журнал «МЕДИЦИНА И КАЧЕСТВО ЖИЗНИ»
20
рации органов и тканей. Костный мозг млекопитаю-
щих, в том числе человека, является нишей не только
гемопоэтических СК, но и других типов стволовых
клеток (мезенхимальные стволовые клетки (МСК),
эндотелиальные прогениторные клетки (ЭПК), рези-
дентные стволовые клетки). Наряду с полностью
дифференцированными клетками во многих органах
и тканях существует определенное количество СК
клеток-предшественников, локализующихся в спе-
циальных тканевых нишах и достаточно равномерно
распределенных по всей массе ткани. При поврежде-
нии различных органов и тканей происходит выход
стволовых клеток из костного мозга и их миграция в
поврежденные ткани. Механизмы, ответственные за
целевую миграцию (хоуминг) МСК и активацию
резидентных предшественников зрелых клеток в тка-
нях, после повреждения остаются во многом непо-
нятными. Между интенсивностью апоптоза и скоро-
стью клеточного обновления в тканях, то есть про-
цесса регенерации, существует прямая зависимость.
Показано, что апоптоз (в отличие от некроза) вызы-
вает каскад реакций, которые стимулируют проли-
ферацию клеток, находящихся на различной стадии
дифференцировки. Это позволяет предполагать, что
процесс программированной гибели клеток сопря-
жен с генерацией эндогенных факторов, выполняю-
щих роль стимуляторов клеточного обновления тка-
ней, в том числе за счет стволовых клеток.
Цель:
поиск и идентификация субстанций, ответс-
твенных за целевую миграцию мезенхимных стволо-
вых клеток, а также активацию резидентных пред-
шественников зрелых клеток для создания иннова-
ционных технологий клеточной терапии тканей в
норме и при патологии.
Для экспериментальной инициации программи-
рованной гибели клеток был изучен диапазон доз
лазерного облучения, которые с высокой повторяе-
мостью вызывали апоптоз клеток ex vivo. Объектами
исследования была культура фибробластов эмбриона
легкого человека и раствор ДНК (контроль).
Фрагментацию ДНК определяли с помощью бро-
мистого этидия, а апоптоз клеток – по связыванию
красителя акридина оранжа. Показано, что при воз-
действии лазером в дозе 6 Дж/см? на раствор ДНК ее
разрушения не происходило. Облучение культуры
фибробластов в этой же дозе сопровождалось при-
ростом фрагментов ДНК в клетках на 67%.
До облучения 6,8% фибробластов в культуре находи-
лисьвсостоянииапоптоза,а3,1%–некроза.Импульсное
воздействие лазером (6 Дж/см?) на фибробласты приво-
дило к усилению апоптоза в культуре клеток в 4 раза.
При увеличении дозы (8, 10 Дж/см?) лазерного воздей-
ствия число клеток с признаками апоптоза уменьша-
лось, а количество некротизированных фибробластов
увеличилось (Тюкавин и соавт., 2005).
Влияние лазерных апоптогенных стимулов на
интенсивность миграции мезенхимных клеток кост-
ного мозга из крови в кожу изучены на мышах линии
С57ВL/6, экспрессирующих белок GFP (проф.
В.Б. Сериков, дар Окландского детского госпиталя,
Калифорния, США). Лазером облучали кожу внут-
ренней поверхности одной из ушных раковин бодрс-
твующих мышей, кожа другой – служила контролем.
Клетки, экспрессирующие GFP, вводили в яремную
вену. Установлено, что через сутки после инъекции
клеток кожа облученного уха была плотно насыщена
клетками с GFP меткой, а в контрольном ухе выявля-
лись единичные клетки с GFP. При увеличении дозы
облучения выраженность структурных нарушений в
тканях увеличивалась, а количество выявленных кле-
ток с меткой GFP уменьшалось. Таким образом,
апоптогенное лазерное облучение стимулирует мигра-
цию мезенхимальных клеток из крови в кожу, а суб-
станциями, вызывающими аттракцию МСК, являют-
ся продукты программированной гибели клеток.
Было сделано предположение, что продуктыапоптоза
являются не только аттрактантами в отношении мезен-
химных клеток; они способны активировать резидент-
ные предшественники зрелых клеток, в частности кар-
диомиоцитов. В первичной культуре клеток миокарда
новорожденных крыс была разработана модель карди-
омиогенеза, от незрелого предшественника до сокраща-
ющихся колоний клеток и гибели кардиомиоцитов,
включая апоптоз (Голованова, Белостоцкая, 2009, 2011,
2012). Показано, что внесение в культуру клетокмиокар-
да суспензии апоптозных тел приводит к усилению про-
лиферации клеток предшественников кардиомиоцитов,
увеличению количества зон, длительности и скорости
сокращения зрелых клеток, а также к образованиюболее
объемных колоний (Тюкавин и соавт., 2011).
Представляется, что продукты апоптоза являются
универсальными субстанциями, которые ответственны
за целевую миграцию мезенхимных стволовых клеток,
а также активацию резидентных предшественников
зрелых клеток в организме. На этой основе могут быть
разработаны лазерные технологии целевой доставки
мезенхимных клеток в организме, а также создан класс
инновационных лекарственных средств – имитаторов
апоптоза, которые позволят вовлекать в процесс вос-
становления поврежденных тканей мезенхимные и
резидентные тканеспецифические стволовые клетки.
Работа выполнена при поддержке РФФИ (грант
№ 11-04-00993а).
ДИНАМИКА НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ,
ОТРАЖАЮЩИХ СОСТОЯНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ
СИСТЕМ ОРГАНИЗМА ДОНОРОВ ПЛАЗМЫ НА ФОНЕ
РЕГУЛЯРНЫХ ДОНАЦИЙ ПЛАЗМЫ
Убайдуллаева З.И., Махмудова Д.С., Очилов Ш.Д.,
Ким Н.Г., Наджимитдинова М.А., Бугланов А.А.
НПП «Кон препаратлари» ГУЗХ г. Ташкента, Общественный фонд
«Кровь на службе людям», г. Ташкент, Республика Узбекистан
Вопросы обеспечения возрастающих потребностей
клиник в компонентах крови для целей гемокомпо-
