Page 23 - pdf_publisher2

тофлавина на биологические эффекты факторов патогенности Y.pestis.

В связи с этим целью данной работы явилась сравнительная оценка состояния процессов липо' пероксидации (ЛПО) и антирадикальной защиты клеток, степени тяжести аутоинтоксикации и ле' тальной активности токсинов Y.pestis в двух вари' антах моделирования чумной интоксикации: без применения медикаментозной коррекции и на фоне воздействия цитофлавина в комплексе с унитиолом, димексидом и селенитом натрия — препаратов со свойствами мембранопротекторов и антиоксидантов.

Экспериментальные исследования были прове' дены на беспородных белых мышах обоего пола с использованием модели чумной интоксикации, достигаемой внутрибрюшинным сочетанным вве' дением липополисахарида (ЛПС) и «мышиного» токсина Y.pestis в дозах, эквивалентных ЛД 50. ЛПС экстрагирован методом Вестфаля'Людерит' ца из штамма Y.pestis 358/12 и осажден смесью спирта и ацетона. «Мышиный» токсин —фракция II — выделен из ацетонированных клеток вакцин' ного штамма Y.pestis EV по методу Бекера. Токси' ны приготовлены во ФГУЗ «Российский НИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора.

Для оценки состояния активности процессов ЛПО исследовали содержание гидроперекисей липидов (ГПЛ) (Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И.,1983) и малонового диальдегида (МДА) в плазме крови и эритроцитах (Суплотов С.Н., Бар' кова Э.Н., 1985).

Тяжесть аутоинтоксикации оценивали по уров' ню молекул средней массы (МСМ) (Гудим В.И., Габриэлян Н.И., 1985) в сыворотке крови экспе' риментальных животных.

Состояние АОС системы крови изучалось по показателям активности супероксиддисмутазы (СОД) цельной крови ( Fried R., 1975), каталазы плазмы крови и эритроцитов (Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова Н.Г. и соавт., 1988), уровню витамина Е плазмы крови и эритроцитах (Габриэлян Н.И., Левицкий Э.Г., Щербакова О.И., 1982), а также перекисной резистентности эритроцитов (Покровский А.А., Абрамов А.А., 1964).

Перечисленные показатели определялись на стадии выраженных клинических проявлений ин' токсикации — спустя 4 часа после сочетанного введения токсинов с использованием общеприня' тых спектрофотометрических методов.

Исследование и расчет летальной активности токсинов проводились по методу Литчфилда'Уил' коксона (1949) в модификации Иванова Ю.И., По'

горелюк О.Н. (1990), продолжительность жизни животных определялась в течение 24 часов с мо' мента сочетанного введения ЛПС и «мышиного» токсина белым мышам.

В целях коррекции метаболических рас' стройств была использована группа препаратов, включающая унитиол, диметилсульфоксид, селе' нит натрия, а также цитофлавин (НТФФ «Поли' сан», Санкт'Петербург). Препараты вводились животным внутрибрюшинно в средних терапевти' ческих дозах спустя 30 минут после инъекции ток' синов.

Результаты проведенных экспериментов обрабо' таны параметрическим статистическим методом с использованием стандартных компьютерных программ (Microsoft «XL», «Statgraphics 5,0») с расчетом средней арифметической, критерия Стьюдента, достоверности различий.

Результаты исследований, проведенных спустя 4 часа с момента развития интоксикации, на фоне тяжелых клинических проявлений патологии (одышки, адинамии, развития летальных исходов у ряда белых мышей), свидетельствовали об акти' вации ЛПО и развитии аутоинтоксикации. При этом уровень ГПЛ и МДА в плазме крови и эри' троцитах, МСМ в сыворотке крови выживших животных значительно превышал показатели контрольной группы животных. Одновременно отмечено нарастание уровня МСМ в сыворотке крови, свидетельствующее об усилении степени тяжести аутоинтоксикации (табл.).

Как показали результаты последующих экспе' риментов, ведущим патогенетическим фактором активации процессов ЛПО является недостаточ' ность АОС крови. Об этом свидетельствовало снижение активности каталазы плазмы и эрит' роцитарной массы, СОД цельной крови, а также содержания α'токоферола в плазме крови и эри' троцитах экспериментальных животных, сочета' ющееся с дестабилизацией эритроцитарных мембран и увеличением процента гемолизиро' ванных эритроцитов (табл.).

Известно, что α−токоферол является одним из неферментных антирадикальных факторов, спо' собных нейтрализовать кислородные радикалы на этапах продолжения и разветвления цепей сво' боднорадикального окисления. СОД инактиви' рует супероксидный анион'радикал в реакции дисмутации с образованием перекиси водорода. В то же время каталаза разлагает образующуюся перекись водорода. Таким образом, СОД и ката' лаза представляют собой единую сбалансиро' ванную ферментную систему антирадикальной защиты клеток [10,13].

Page 23 - pdf_publisher2_project

Page 23 - pdf_publisher2_project